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PAS染色全稱(chēng)為過(guò)典酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiff, PAS),又稱(chēng)糖原染色。一般用來(lái)顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。
染色原理
細胞胞漿中存在糖原或多糖類(lèi)物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過(guò)典酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無(wú)色品紅結合后呈現紫紅色,沉積在細胞內多糖所在之處。
染色步驟
1、組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多巨甲醛固定后水洗);
2、滴加過(guò)典酸溶液,氧化5min;
3、蒸餾水洗10min;
4、滴加Schiff試劑,侵染10-20min;
5、傾去Schiff 試劑,流水沖洗10min;
6、滴加蘇木素染色液,染核1-2min;
7、流水沖洗5min;
8、酸性乙醇分化液分化;
9、Scott反藍水洗3min;
10、常規透明、封片。
染色結果
PAS染色結果
糖原、多糖類(lèi)物質(zhì)及其他PAS反應陽(yáng)性物質(zhì)呈紫紅色,細胞核呈藍色。
注意事項
1、高典酸溶液為透明溶液,配制后放4度冰箱備用,無(wú)法從常規的顏色辨別高典酸的好壞,需要定期更換;
2、染色試劑均應低溫保存,臨用前半小時(shí)取出恢復室溫;
3、Schiff染液染色時(shí)間可隨溫度調整,室溫高可減少染色時(shí)間,冬季室溫低,可延長(cháng)至20 min左右。
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