掃描電鏡（SEM）生物標本的制備是一個(gè)精細的過(guò)程，需要特別注意樣品的形態(tài)保持、干燥和導電性。以下簡(jiǎn)介掃描電鏡生物標本制備的一般操作：

1. 取材：選擇適當的生物材料，如組織或細胞，并迅速將其切取。對于組織取材，切除組織要快，并迅速浸入預冷的固定液中，以防止細胞自溶。

2. 固定：使用適當的固定液，如2%-4%的戊二醛（glutaraldehyde），在4°C下固定1-2小時(shí)。戊二醛能較好地保存微細結構，但對組織抗原有一定影響。

3. 漂洗：用磷酸鹽緩沖液（PBS）在4°C下漂洗0.4-2小時(shí)，中間需換液2次，以去除多余的固定液。

4. 脫水：使用一系列濃度遞增的乙醇或丙酮溶液進(jìn)行脫水，如50%、70%、80%、90% 至 100%，每次脫水15分鐘至30分鐘。

5. 臨界點(diǎn)干燥：為了避免樣品在干燥過(guò)程中發(fā)生形變，可以使用臨界點(diǎn)干燥器進(jìn)行干燥，這一步驟對于保持生物樣品的原始形態(tài)至關(guān)重要。

6. 導電處理：由于掃描電鏡需要在真空中進(jìn)行觀(guān)察，樣品必須能夠導電以避免電荷積累?？梢允褂媒饘倌z帶、噴金或鍍鉑等方法使樣品表面導電。

7. 樣品安裝：將干燥和導電處理后的樣品安裝到SEM專(zhuān)用的樣品托上。確保樣品穩固，避免在高真空環(huán)境下樣品移動(dòng)或振動(dòng)。

8. 觀(guān)察：在SEM中進(jìn)行觀(guān)察前，可能需要對樣品進(jìn)行額外的處理，如噴金增加導電性，或使用冷臺減少樣品在觀(guān)察過(guò)程中的荷電現象。

9. 顯微鏡操作：在SEM中，通過(guò)調節適當的參數，如加速電壓、工作距離等，進(jìn)行生物樣品的成像。
制備過(guò)程中，樣品的每個(gè)步驟都需小心操作，以保證最終成像的質(zhì)量和準確性。此外，樣品制備的具體細節可能會(huì )根據樣品的類(lèi)型和所需的特定信息有所不同。

文章出自：掃描電鏡實(shí)驗    想了解更多請關(guān)注：http://www.shiyi86.com/