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PAS染色又稱(chēng)過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。
原理:過(guò)碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結合,紅色,定位于胞漿上。
細胞胞漿中存在糖原或多糖類(lèi)物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過(guò)典酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無(wú)色品紅結合后呈現紫紅色,沉積在細胞內多糖所在之處。
染色步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水(細胞涂片,冰凍切片直接水洗);
2. 蒸餾水洗;
3. 過(guò)碘酸酒精液10min;
4. 自來(lái)水沖洗10min;
5.Schiff氏液10min;
6. 流水沖洗5min;
7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細胞核染色過(guò)深可用鹽酸酒精分化);
8. 流水沖洗5min;
9. 常規脫水、透明、封固。
結果
PAS陽(yáng)性為紅色,細胞核藍色。
注意事項
1、高典酸溶液為透明溶液,配制后放4度冰箱備用,無(wú)法從常規的顏色辨別高典酸的好壞,需要定期更換;
2、染色試劑均應低溫保存,臨用前半小時(shí)取出恢復室溫;
3、Schiff染液染色時(shí)間可隨溫度調整,室溫高可減少染色時(shí)間,冬季室溫低,可延長(cháng)至20 min左右。
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