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    瑞氏-吉姆薩染色 原理 步驟

    日期:2024-08-06 返回

    瑞氏-吉姆薩染色(Wright-Giemsa Staining)原理:

    瑞氏染料由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍組成。血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結合呈紅色;細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性蛋白質(zhì),與堿性染料美藍或天青結合,呈紫藍色;中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結合,呈淡紫色。

    吉姆薩染料由伊紅,天青組成,染色原理與瑞氏染色法基本相同。

    瑞氏染色法對細胞漿內的顆粒染色效果好,但對細胞核的染色不如吉姆薩染色法。吉姆薩染色法對細胞核著(zhù)色好,但對胞漿顆粒著(zhù)色較差,且有時(shí)對細胞核著(zhù)色較深,核結構顯示不佳。為兼顧二者之長(cháng),常用瑞氏-吉姆薩復合染色法。

    用途和目的:常用于血液涂片、肺泡灌洗液涂片、骨髓細胞涂片、細菌、染色體、組織切片等的染色。標本染色后,相應各類(lèi)細胞呈現不同的著(zhù)色,從而達到辨別其形態(tài)特征的目的。

    染色步驟:

    1. 自來(lái)水流水緩慢沖洗晾干后的載玻片洗去載玻片上的雜質(zhì),注意流水從涂片上方流下,避免直接沖洗細胞;

    2. 將載玻片晾干后置于瑞士染液中染色10min;

    3. 盡量瀝干載玻片,再置于吉姆薩染液中染色4min。染色完畢后流水緩慢沖洗載玻片,將多余染液洗去;

    4. 載玻片晾干后顯微鏡下觀(guān)察。

    此法我們常用于小鼠肺泡灌洗液涂片的染色,其他標本可以根據染色結果適當調整染色時(shí)間。

    顯微鏡下細胞的辨別:

    紅細胞:平均直徑7μm,細胞呈粉紅至紅色,中央因雙凹圓盤(pán)結構而呈現空白。

    單核細胞:胞體圓至橢圓形,直徑12-20μm,胞漿灰藍色且稍有粗糙感,半透明似毛玻璃,胞質(zhì)中常有小空泡。成熟的單核細胞胞核呈腎形、馬蹄形、不規則形等,細胞核常有扭曲和折疊感。

    淋巴細胞:分大(直徑12-15μm)、?。ㄖ睆?-9μm)兩大類(lèi),圓形或橢圓形,胞質(zhì)淡藍色透明,無(wú)顆?;蚺加袛殿w紫紅色的嗜天青顆粒。核圓形,直徑接近細胞直徑80%,染色質(zhì)呈濃集的團塊狀。

    中性粒細胞:胞體圓形至橢圓形,直徑10-15μm。胞質(zhì)呈無(wú)色或極淺的淡粉紅色,彌散分布許多淺紅或淺紫的細小顆粒。細胞核形態(tài)多樣,可呈長(cháng)桿狀,也可為分葉狀核,2-5葉不等,葉與葉間有細絲相連。

    嗜酸性粒細胞:細胞直徑13-15μm,胞漿中充滿(mǎn)嗜酸性顆粒,顆粒粗大整齊,排列均勻緊密,為磚或鮮紅色。在染色較深的涂片中,顆粒呈現深橙、棕至咖啡色。細胞核分葉,多為兩葉呈眼鏡狀,顏色為深紫色,偶見(jiàn)3葉。



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