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    Masson染色實(shí)驗操作流程

    日期:2024-07-30 返回

    原理:

    馬松(Masson)染液是顯示組織中纖維染色的主要方法之一,是膠原纖維(collagen fiber)染色權威而經(jīng)典的技術(shù)方法。主要適用于膠原蛋白和平滑肌的鑒別分析。廣泛用于結締組織、肌肉組織和膠原蛋白的研究等。

    該產(chǎn)品染膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色;胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)呈紅色;胞核藍紫色。

    該產(chǎn)品具有無(wú)毒、環(huán)保,對人體無(wú)傷害、操作簡(jiǎn)捷,性能穩定,顯色清晰,顏色鮮艷,對比清晰分明且染色穩定、所染切片保存時(shí)間長(cháng)且不易褪色等特點(diǎn),根據組織不同的滲透性能,選擇分子大小不同的陰離子的染料進(jìn)行染色,便可把不同組織成分顯色出來(lái)。

    1.  石蠟切片脫蠟至水;

    2.  鉻化處理或去汞鹽沉淀,飽和苦味酸酒精溶液去福爾馬林色素;

    3.  依次自來(lái)水和蒸餾水洗;

    4.  用蘇木素染色液染核5-15min(可以不染細胞核);

    5.   充分水洗,顯藍后鏡檢,至胞核呈藍色為止,如如過(guò)染可鹽酸酒精分化;

    6.   蒸餾水洗;甩干水分,將玻片水平放置在免疫組化濕盒上,沒(méi)有此盒的實(shí)驗室,建議將玻片水平放置在托盤(pán)上或者任何你能找到的容器內。在標本上,滴加數滴麗春紅酸性復紅染色液,染液覆蓋住標本即可。水平放置,室溫染色染色5-10min;

    7.  使用0.2%冰醋酸水溶液,清洗玻片,去除紅色浮色,每次1min,3次;

    8.   甩干玻片上的水分,滴加磷鉬酸水溶液分化處理1-3min;

    9.  用濾紙擦掉多余液體,注意濾紙不要接觸到樣本。不經(jīng)水洗,直接用苯胺藍染色液染5-10min;

    10. 用冰醋酸水溶液清洗玻片,去除多余染液,使染色色調清晰鮮艷即可;

    11. 無(wú)水酒精脫水、二甲苯透明、中性樹(shù)膠封固。

    結果分析:

    膠原纖維、黏液、軟骨呈藍色,胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)呈粉紅色。

    注意事項:

    1.  無(wú)水酒精、二甲苯透明、中性樹(shù)膠需自備;

    2.  鉻化處理及脫汞:用0.5%碘酒溶液處理10min,水洗,再用0.5%硫代硫酸鈉水溶液脫碘5min,充分水洗;用10%飽和苦味酸酒精溶液再次固定30min,再進(jìn)行步驟3水洗。

    3.  此法操作程序較多,一定要控制好染色步驟,熟練掌握后才能得到較滿(mǎn)意的染色結果;

    4.  組織固定起著(zhù)很重要的作用,根據不同的固定液可延長(cháng)或縮短染色時(shí)間;

    5.  0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色調清晰鮮艷,不夠可以自己配制;

    6.  磷鉬酸對麗春紅酸性復紅有分化作用,分化時(shí)鏡下控制,肌纖維和纖維素呈紅色,膠原纖維呈淡粉紅色即可。



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